今天我們分享的是一個大齡姐姐的案例。M女士來到日本英醫(yī)院的時候，已經(jīng)42歲了，在最近的一次的微刺激方案中，取卵12顆，采用pizeo-ICSI的受精方式，其中有10顆卵子成熟并順利受精分裂，最終培養(yǎng)9顆囊胚！

不過M女士并不是一開始就很順利的。她在國內(nèi)第一次拮抗方案“顆粒無收”，來到日本英醫(yī)院以后，醫(yī)生為她調(diào)整為微刺激方案，果然第二次第三次進(jìn)周時都有不錯的成績。

下面是M女士進(jìn)周記錄

1、2018年9月國內(nèi)進(jìn)周，拮抗方案，采卵10顆，很遺憾都沒有發(fā)育到囊胚。

2、2019年轉(zhuǎn)戰(zhàn)日本英醫(yī)院，8月進(jìn)周，醫(yī)生根據(jù)她的情況及時調(diào)整了方案，采用微刺激方案，采卵10顆，4顆囊胚，2顆通過了PGT篩查。

3、2019年12月在英醫(yī)院第二次進(jìn)周，微刺激方案，采卵12顆，9顆到達(dá)囊胚。正在等待PGT結(jié)果。

從全軍覆沒，到一次收獲9顆囊胚，三次取卵的獲卵數(shù)量差不多，但是養(yǎng)囊結(jié)果一次比一次好，這也印證了實驗室技術(shù)對胚胎培養(yǎng)的重要性。

大家都知道，每個生殖中心的促排方案和用藥并沒有太大差別，重要的在于精子卵子取出后如何培養(yǎng)。任何一個微小的細(xì)節(jié)都可能影響受精卵分裂。

不過，要用一兩句話把胚胎培養(yǎng)的技術(shù)特點講清楚，還真不是一件容易的事。所謂日本的匠人精神有時候需要細(xì)細(xì)品味，畢竟天使在想象中，魔鬼在細(xì)節(jié)里......

今天我們就一起來深入日本英醫(yī)院的培養(yǎng)室，看看哪些原因會讓受精卵中途掉隊，而培養(yǎng)師又在做些什么幫助他們闖關(guān)呢？

精子和卵子的生命只有24-48小時，如果Ta們沒有受精結(jié)合，就會走向凋亡。

如果Ta們相遇并且結(jié)合，新的受精卵就被賦予了生命力，細(xì)胞開始分裂生長，成為一個新的生命。

是的，從受精的那一剎那，神秘之門就被開啟了。

這顆攜帶著新的遺傳密碼的受精卵，從一個受精卵開始倍數(shù)分裂。Day1分裂為2細(xì)胞；Day2分裂為4細(xì)胞；Day3分裂為8細(xì)胞 ...... Day5-6分裂為多細(xì)胞囊胚，然后會被放入子宮植入孵化或暫時凍結(jié)起來。

胚胎是住在培養(yǎng)室里的。

日本英醫(yī)院的培養(yǎng)室保持24小時恒溫恒濕超凈，18臺大型受精卵培養(yǎng)器全天候工作，24小時Timelapse系統(tǒng)及人員監(jiān)控，溫度、濕度、氧氣濃度、氮氣濃度等每一項，都是有經(jīng)過反復(fù)校對的標(biāo)準(zhǔn)的。

英醫(yī)院的培養(yǎng)師團隊由約50名遺傳學(xué)博士、碩士組成，每一位培養(yǎng)師都需要經(jīng)過4年的訓(xùn)練才能從事臨床實際操作。

下圖就是日本英醫(yī)院培養(yǎng)室的一個操作間，這里在培育的胚胎細(xì)胞，未來會成為一個個新的小生命。

下圖這些方形容器就是胚胎居住的小區(qū)，為了減少每次開箱對胚胎的影響，每個培養(yǎng)箱只存放兩人的胚胎。

這是胚胎住的房子——培養(yǎng)皿，看起來像隱形眼鏡盒，里面放著培養(yǎng)液。在日本英醫(yī)院必須經(jīng)過3位以上的培養(yǎng)師核對后才能加入培養(yǎng)液。

在日本英醫(yī)院，有一個特別的規(guī)定，每次培養(yǎng)師拿培養(yǎng)皿的時候，必須是用“右手托底，左手扶上”的方法，確保胚胎在移動過程中萬無一失。這些微小的細(xì)節(jié)都是養(yǎng)囊成功率的保證。

培養(yǎng)師需要觀察或操作的時候，會把培養(yǎng)皿取出來。日本英醫(yī)院的檢卵、受精、對胚胎的觀察等操作是在下圖這樣特制的類似新生兒保育器的操作箱中進(jìn)行。該操作箱是由英醫(yī)院的創(chuàng)始人鹽谷院長在嬰兒恒溫箱的基礎(chǔ)上自主研發(fā)而成，箱內(nèi)恒定37度，接近人體體溫，并嚴(yán)格控制二氧化碳及氧氣的比例，創(chuàng)造出一個模擬子宮的優(yōu)良環(huán)境，更加有利于胚胎的發(fā)育。

胚胎培養(yǎng)成功后，如果不是移植鮮胚，就會被凍結(jié)和存儲在液氮罐里成為凍胚。日本英醫(yī)院會把這些胚胎專門放在有特殊加固的抗震房間中保存。這樣的保存方式，胚胎保存20年之久也是毫無問題的。

培養(yǎng)液是胚胎生長發(fā)育的載體，也是胚胎營養(yǎng)的來源。

胚胎培養(yǎng)液的主要成分是水鹽類能量物質(zhì)、氨基酸、維生素、蛋白質(zhì)等，這些成分組成模擬了胚胎在母體內(nèi)發(fā)育的環(huán)境。它的酸堿度滲透壓營養(yǎng)成分能量物質(zhì)等，每個參數(shù)對于胚胎的成長都是至關(guān)重要的。

把受精卵往水里一丟就完事？可沒有那么簡單哦。

受精卵會新陳代謝不斷產(chǎn)生廢物，而且不同成長階段的胚胎對培養(yǎng)液的要求不一樣哦！在8細(xì)胞之前用丙酮酸和乳酸進(jìn)行代謝，8細(xì)胞之后則需要更多的葡萄糖和氨基酸。所以及時更換培養(yǎng)液至關(guān)重要。

它們可不好伺候?。∨囵B(yǎng)師苦笑中......

整個培養(yǎng)過程中培養(yǎng)師需要連續(xù)性調(diào)整培養(yǎng)液的成分并及時更換掉廢液。除了連續(xù)型培養(yǎng)液，還會用到鈣離子增強、采用微電擊増強分裂等操作，培養(yǎng)師就是胚胎的保育員。

此外，每次胚胎培養(yǎng)成功之后，培養(yǎng)師還會把這些培養(yǎng)液收集起來，為將來進(jìn)行SEET法移植做準(zhǔn)備，因為培養(yǎng)液中含有一部分胚胎代謝組織，對子宮內(nèi)膜可以起到很好的刺激作用，更加有利于胚胎著床。

胚胎發(fā)育過程中需要及時監(jiān)測，以便對發(fā)育過程中的問題及時干預(yù)處理。過去，培養(yǎng)師只能通過有限的幾次將發(fā)育中的胚胎從培養(yǎng)箱中取出來，來觀測判斷胚胎的發(fā)育狀況。現(xiàn)在有了Time-lapse培養(yǎng)系統(tǒng)，通過延時攝像技術(shù)，可以將胚胎幾天的培養(yǎng)過程濃縮到數(shù)分鐘內(nèi)的視頻中，不需要將胚胎取出觀察。更加保證了胚胎發(fā)育環(huán)境的穩(wěn)定性，減少接觸外部細(xì)菌的機會。

這是Timelapse系統(tǒng)對受精卵從16小時到106小時的監(jiān)測照片：

通過Timelapse系統(tǒng)，培養(yǎng)師可以靜態(tài)觀察，也可以對生長過程進(jìn)行多位點觀察和動態(tài)觀察，從而更準(zhǔn)確的判斷胚胎的發(fā)育潛能，及時做出干預(yù)，比如處理受精以后的單核、多核現(xiàn)象等。

這么可愛的問題拜托不要到日本英醫(yī)院問哦。在日本如果有1例胚胎差錯就屬于嚴(yán)重醫(yī)療事故，醫(yī)院就要關(guān)門了......

日本英醫(yī)院已經(jīng)實施了全程條形碼匹配，從患者帶的手環(huán)、培養(yǎng)皿、精液調(diào)整器，所有的環(huán)節(jié)都是人工和電腦雙重識別，從而杜絕了由于人工失誤造成錯誤的可能性。

看到了這些強大的實驗室技術(shù)加持，就不難理解囊胚培養(yǎng)是水到渠成的事了。在日本英醫(yī)院，有80%的患者選擇培養(yǎng)囊胚，而且在患者平均年齡39歲的情況下，英醫(yī)院的平均養(yǎng)囊率達(dá)到50%。

綜上，除了患者本身的情況以外，胚胎培養(yǎng)結(jié)果與醫(yī)生的方案制定、生殖中心實驗室技術(shù)水平都是息息相關(guān)的。希望大家綜合評估適合自己的方案以及生殖中心，找到最順暢的尋寶路徑！